考馬斯亮藍(lán)脫色液(常規(guī)法)
|
產(chǎn)品編號(hào)
|
規(guī)格
|
貯存
|
|
RTD6204
|
500ml
|
常溫
|
● 儲(chǔ)存條件
常溫保存，開封后一年有效。
● 產(chǎn)品簡介
考馬斯亮藍(lán)脫色液(Commassie
Blue Staining Destaining Solution)是用于蛋白凝膠考馬斯亮藍(lán)染色后凝膠的脫色。本脫色液可以和考馬斯亮藍(lán)染色液(RTD6203)配套使用。使用本脫色液進(jìn)行脫色，采用常規(guī)脫色方法至少脫色1小時(shí)可以觀察到蛋白條帶；采用快速脫色方法不足20分鐘即可觀察到蛋白條帶。觀察到最清晰的蛋白條帶則需脫色更長時(shí)間。
本脫色液經(jīng)過改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性氣味的乙酸。
● 使用說明：
一. 常規(guī)染色脫色方法：
1.
電泳結(jié)束后，取凝膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中，確保染色液可以充分覆蓋凝膠。
2.
置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng)，室溫染色1小時(shí)或更長時(shí)間。
注：具體的染色時(shí)間取決于凝膠的厚度和染色時(shí)的溫度。凝膠較厚，溫度較低，則染色時(shí)間宜適當(dāng)延長。凝膠較薄，溫度較高，則染色時(shí)間可以適當(dāng)縮短。通常染色至凝膠的顏色和染色液的顏色非常接近，在染色液中幾乎看不清凝膠時(shí)，可以認(rèn)為已染色充分。染色2-4個(gè)小時(shí)或更長時(shí)間不會(huì)對(duì)最終的染色效果產(chǎn)生負(fù)面影響。
3.
倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用至少2-3次。
4.
加入適量脫色液，確保脫色液可以充分覆蓋凝膠。
注：脫色液可以使用考馬斯亮藍(lán)脫色液(RTD6204)；如果希望自行配制，推薦的脫色液配方為：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸餾水。
5.
置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng)，室溫脫色4-24小時(shí)。期間更換脫色液2-4次，直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去，并且蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。通常蛋白條帶在脫色1-2小時(shí)后即可出現(xiàn)。
注：脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙，可以使部分染料吸附在吸水紙上，加快脫色。脫色時(shí)間過長也會(huì)導(dǎo)致蛋白條帶的顏色變淺。
6． 完成脫色后，可以把凝膠保存在水中，用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會(huì)發(fā)生溶漲。如需避免溶漲，可以把膠保存在含20%甘油的水中。長期保存可以制備干膠。
二. 快速染色脫色方法：
1.
電泳結(jié)束后，取膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中，微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加熱。通常對(duì)于膠濃度大于10％的膠比較堅(jiān)韌，在發(fā)生煮沸時(shí)不易破損；對(duì)于膠濃度小于10%的膠，宜盡量避免煮沸，以免出現(xiàn)膠碎裂的情況。
2.
隨后在染色液溫度較高的情況下，在室溫?fù)u床上搖動(dòng)5-10分鐘。
3.
倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用至少2-3次。
4.
加入適量脫色液，確保染色液可以充分覆蓋凝膠。
注：脫色液可以使用考馬斯亮藍(lán)染色脫色液(RTD6204)；如果希望自行配制，推薦的脫色液配方為：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸餾水。
5.
微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加熱。
6.
隨后在脫色液溫度較高的情況下，在搖床上搖動(dòng)5-10分鐘。此時(shí)通?？梢杂^察到比較清楚的蛋白條帶。
7.
更換新鮮的脫色液，重復(fù)步驟5和步驟6，直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去，蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。
8.
完成脫色后，可以把凝膠保存在水中，用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會(huì)發(fā)生溶漲。如需避免溶漲，可以把膠保存在含20%甘油的水中。長期保存可以制備干膠。