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FastBlue蛋白染色液
產(chǎn)品編號(hào) |
規(guī)格 |
貯存 |
運(yùn)輸 |
RTD6202-02 |
500ml |
常溫 |
常溫 |
● 儲(chǔ)存、效期及運(yùn)輸:
常溫貯存;有效期兩年;常溫運(yùn)輸。
注:如4℃貯存,會(huì)有結(jié)晶形成,37℃溫浴融化后可繼續(xù)使用。
● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
FastBlue蛋白染色液是以考馬斯亮藍(lán)G-250為主要成分,采用新配方配置而成??捎糜赟DS-PAGE或非變性PAGE膠(native gel)的快速染色。
特點(diǎn):方便快捷-不用漂洗,不用加熱,不用脫色,不用固定,條帶5分鐘可見(jiàn)。
靈敏度高-檢測(cè)下限10 ng蛋白
兼容性好-適用于變性和非變性膠以及質(zhì)譜分析
綠色環(huán)保-不含甲醇,冰醋酸
● 用前必讀:
1 使用前如發(fā)現(xiàn)瓶中有少許沉淀,請(qǐng)混勻后使用。
2以下“使用方法”是針對(duì)0.75mm厚度,10×10cm凝膠染色程序。
● 使用方法:
1. 漂洗:將電泳后的PAGE膠取下放入塑料容器中,用適量蒸餾水漂洗一下。
2. 染色:棄蒸餾水,加入適量染色液(以剛剛覆蓋過(guò)膠面為適),搖床上常溫?fù)u動(dòng),根據(jù)下表確定染色時(shí)間。
待檢測(cè)蛋白量 |
染色時(shí)間 |
>1 μg |
~5分鐘 |
100 ng-1 μg |
~10分鐘 |
10 ng-100 ng |
~60分鐘 |
3. 脫色:收集染色液于容器中,凝膠中加入適量蒸餾水漂洗凝膠,洗去浮色;蒸餾水中搖床常溫?fù)u動(dòng)脫色~10分鐘;重復(fù)脫色一次至凝膠幾乎無(wú)藍(lán)色背景。
4. 記錄:觀察記錄結(jié)果。
● 附:質(zhì)譜處理程序
1. 切下待檢蛋白條帶置于1.5ml離心管中。
2. 加入1ml 30%乙醇或30%丙酮(也可用30%醋酸,但會(huì)導(dǎo)致蛋白N端?;?。
3. 處理30分鐘。
4. 重復(fù)步驟2,3直到去除所有染料。一般處理2-3次既能完全去除染料。
5. 質(zhì)譜分析。
● 注意事項(xiàng):
1. 使用方法中的各種參數(shù)僅針對(duì)面積8×10cm或10×10cm,厚度0.75mm的凝膠,如果使用更大面積或更厚的凝膠,請(qǐng)加入更多的染色液并延長(zhǎng)染色的時(shí)間。
2. 常規(guī)染色所需的漂洗,固定,脫色步驟都無(wú)必要。
3. 本染色液可以重復(fù)利用1-2次,敏感性會(huì)有輕微下降,請(qǐng)延長(zhǎng)染色時(shí)間。
4. 本染色液有輕微腐蝕性,請(qǐng)帶手套操作。使用后,請(qǐng)蓋好瓶蓋,常溫密封保存。
● 問(wèn)題解答:
Q1 FastBlue染膠的最佳溫度是多少? |
A1 為達(dá)到最佳的染色效果,推薦常溫(20-25℃)染色。 |
Q2 FastBlue溶液需要低溫貯存嗎? |
A2 Fastblue不需要低溫貯存,常溫貯存(20-25℃)即可。4-8℃貯存,FastBlue會(huì)有結(jié)晶生產(chǎn),37℃溫浴融化后可繼續(xù)使用。 |
Q3 FastBlue的染色原理是什么? |
A3 FastBlue染色原理與經(jīng)典考馬斯亮藍(lán)G250染色原理相同(與蛋白質(zhì)中堿性氨基酸結(jié)合),優(yōu)點(diǎn)是更加快速和更高的靈敏度。 |
Q4 FastBlue染色后,凝膠可以用蒸餾水保存嗎? |
A4 可以,蒸餾水保存最為簡(jiǎn)單,也可以保存在稀釋的冰醋酸中。 |
Q5 FastBlue染色后的凝膠能做質(zhì)譜分析嗎? |
A5 可以。請(qǐng)參閱“質(zhì)譜處理程序”。 |
Q6 FastBlue染色的凝膠能做Western Blot嗎? |
A6 不可以。蛋白的染色是不可逆的,染色的凝膠不能用作下游的轉(zhuǎn)膜操作。 |
Q7 Fastblue能重復(fù)使用嗎? |
A7 FastBlue可以重復(fù)使用2-3次,但靈敏度有所下降,可以通過(guò)延長(zhǎng)染色時(shí)間來(lái)彌補(bǔ)。 |
Q8 為什么凝膠過(guò)夜染色后條帶出現(xiàn)涂抹狀拖尾? |
A8 FastBlue過(guò)夜染色不會(huì)對(duì)凝膠過(guò)度染色。出現(xiàn)抹涂狀拖尾原因是上樣量太大,因?yàn)?/strong>FastBlue染色靈敏度較高。另外,分子量較小的蛋白在過(guò)夜染色中會(huì)有擴(kuò)散現(xiàn)象,我們推薦染色最好在60分鐘內(nèi)完成。 |
Q9 FastBlue有固定凝膠的作用嗎? |
A9 FastBlue是水系溶液,沒(méi)有固定凝膠的作用。然而,由于染色會(huì)在60分鐘內(nèi)完成,染色前無(wú)需對(duì)凝膠進(jìn)行固定。 |
中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所提供照片
多肽電泳配套試劑
名稱 |
貨號(hào) |
規(guī)格 |
RTD6120 |
10次 |
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RTD6101 |
10次(100 μl) |
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RTD6125 |
10次(50 μl) |
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RTD6110 |
10次 (50 μl) |
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RTD6145-01 |
10次 (50 μl) |
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AC1914-01 |
100ml |
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AC2914-01 |
100ml |
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GB010-100ml |
100ml |
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TP050 |
10×1ml |
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RTD6202 |
500ml |
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EA0582-02 |
100 ml |
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CB010P |
500 ml |
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AB080 |
250 ml |
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CB010 |
100 ml |
使用FastBlue蛋白染色液發(fā)表部分文章列表:
1. [2016 IF=1.64] Effects of washing and
membrane removal pretreatments on the antioxidant properties of grass carp
(Ctenopharyngodon idella) protein hydrolysates produced by in vitro digestion.
Author: Xiaowei Zhang,Qixing Jiang,Yanshun Xu,Wenshui
Xia.
Product: RTD6202 FastBlue蛋白染色液
Journal: International Journal of Food Science and
Technology. 2017,52, 1260-1268.
Institution:State Key Laboratory of Food Science and
Technology, School of Food Science and Technology, Jiangnan University
Paper link:https://ifst.onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/ijfs.13393
2. [2017 IF=0.707] Prominent enhancement of
peptide-mediated targeting efficiency for human hepatocellular carcinomas with
composition-engineered protein corona on gold nanoparticles.
Author: Xiaowei Zhang, Fang Yang, Qixing
Jiang, Yanshun Xu & Wenshui Xia.
Product: RTD6202 FastBlue蛋白染色液
Journal: Journal of Aquatic Food Product Technology.
2018,Vol. 27, NO. 5, 580–591.
Institution:State Key Laboratory of Food Science and
Technology, School of Food Science and Technology, Jiangnan University
Paper link:https://doi.org/10.1080/10498850.2018.1461155
3. [2022 IF=5.518] Prominent enhancement of
peptide-mediated targeting efficiency for human hepatocellular carcinomas with
composition-engineered protein corona on gold nanoparticles.
Author: Mingpeng Liu, Wenjia Lai, Mengting
Chen, Pengyu Wang, Jingyi Liu, Xiaocui Fang, Yanlian Yang, Chen Wang.
Product: RTD6202 FastBlue蛋白染色液
Journal: Colloids and Surfaces A: Physicochemical
and Engineering Aspects. 662
(2023) 131016.
Institution:National Center for Nanoscience and
Technology,CAS
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